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Peps6-捕獲BAC試劑盒 說明書
發(fā)布時間： 2025-06-11 點擊次數(shù)： 434次Apohtech ? 產(chǎn)品與服務(wù)
Peps6-捕獲BAC試劑盒
描述：
Peps6-CaptoBAC試劑盒在大多數(shù)樣本中進(jìn)行細(xì)菌捕獲。它包括涂有Peps6的磁珠和一種特別開發(fā)的緩沖液，以確保最佳的細(xì)菌捕獲。 根據(jù)試劑盒說明，將樣本稀釋在緩沖液中，然后加入磁珠。經(jīng)過短暫的振蕩孵育后，去除上清液，同時磁鐵（不提供）將磁珠固定在下方。然后細(xì)菌在磁珠上濃縮，并且沒有潛在的抑制劑。它們可以用常規(guī)檢測方法進(jìn)行分析。 該產(chǎn)品的保質(zhì)期為2年，保存在2-8°C。該產(chǎn)品有25或50測試格式可供選擇。
參考編號：MP10031-50T
數(shù)量：50次測試
成分：
1 mL的Peps6磁珠（編號：MP20006-1ML）
50毫升緩沖液TTGB 10X（編號：TP10004-50ML）
Peps6-捕獲BAC試劑盒
描述：
Peps6-CaptoBAC試劑盒在大多數(shù)樣本中進(jìn)行細(xì)菌捕獲。它包括涂有Peps6的磁珠和一種特別開發(fā)的緩沖液，以確保最佳的細(xì)菌捕獲。 根據(jù)試劑盒說明，將樣本稀釋在緩沖液中，然后加入磁珠。經(jīng)過短暫的振蕩孵育后，去除上清液，同時磁鐵（不提供）將磁珠固定在下方。然后細(xì)菌在磁珠上濃縮，并且沒有潛在的抑制劑。它們可以用常規(guī)檢測方法進(jìn)行分析。 該產(chǎn)品的保質(zhì)期為2年，保存溫度為2-8°C。該產(chǎn)品有25或50測試格式可供選擇。
參考編號：MP10031-25T
數(shù)量：25次檢測
成分：
0.5 mL的Peps6磁珠（參考編號：MP20006-0.5ML）
25 毫升緩沖液 TTGB 10X（參考編號：TP10004-25ML）
1. 簡介
合成分子 Peps6 源自載脂蛋白 H（ApoH），保留了其結(jié)合微生物的能力，包括病毒（1-2）、真菌（3）和細(xì)菌（4-6）。ApoH 蛋白也稱為載脂蛋白 H 或 β2 - 糖蛋白 1，其多特異性允許對多種微生物進(jìn)行多重捕獲。這種親和捕獲方法簡單、溫和且快速，可使微生物保持活力和感染性。捕獲的微生物被濃縮并與潛在抑制劑分離，從而更易通過常規(guī)特異性技術(shù)（如 PCR、ELISA 等）進(jìn)行鑒定 / 檢測，顯著提升靈敏度（7-10）。
這些特性使 Peps6-CaptoBAC 試劑盒成為一種創(chuàng)新的樣品預(yù)處理工具，用于細(xì)菌分離，以便進(jìn)行高靈敏度的鑒定 / 檢測。2. 123原理
在 Peps6-CaptoBAC 試劑盒中，Peps6 與磁珠結(jié)合。試劑盒提供一種特殊結(jié)合緩沖液，可增強(qiáng) Peps6 對細(xì)菌的親和力。將 Peps6 磁珠加入任何復(fù)雜生物樣本中（用提供的緩沖液稀釋），樣本中的初始雜質(zhì)和潛在抑制劑可被去除，而通過 Peps6 與磁珠結(jié)合的細(xì)菌則通過磁鐵保留在試管中。隨后，細(xì)菌可通過分子技術(shù)（PCR）、免疫檢測（ELISA、WB）或在合適培養(yǎng)基中培養(yǎng)等方法進(jìn)行鑒定 / 檢測。
3. 45試劑
REF MP20006 – Peps6 磁珠
合成 Peps6 包被的磁珠懸浮液濃度為1013個珠子 / 毫升，珠子直徑約 200 nm，緩沖液含 < 0.02% 疊化鈉。
REF TP1006704 – TTGB 10X 緩沖液
TTGB 10X 緩沖液為淺黃色水性結(jié)合緩沖液，經(jīng) 0.2 µm 過濾，濃縮 10 倍，使用前需按說明稀釋。
注意：試劑盒中89的所有試劑均可單獨購買。4. 10存儲
所有試劑可在室溫下運輸，功能不受影響；收到后需存儲于 2-8°C。
所有試劑在 2-8°11C 下可穩(wěn)定保存至有效期。
Peps6 磁珠瓶需12直立存放，確保磁珠始終浸沒在存儲液中。
使用后，所有試劑需13迅速放回 2-8°C 存儲。
5. 14所需材料（未提供）
無菌蒸餾水。
合適的微量移液器和無菌濾芯吸頭。
合適的反應(yīng)管（玻璃或聚丙烯塑料材質(zhì)，避免聚苯乙烯）。
孵育過程中用于樣品15攪拌的設(shè)備。
溫控培養(yǎng)箱。
層流罩或目標(biāo)微生物所需的特定微生物環(huán)境。
與試管兼容的側(cè)向磁16吸裝置（注意：不同市售磁鐵的吸引力和速度可能不同）。
目標(biāo)微生物檢測所需17的材料和試劑。
6. 18安全注意事項
為確保穩(wěn)定性，所有試劑需小心處理，避免污染。
是否需要無菌操作區(qū)19域取決于捕獲微生物的用途（如需培養(yǎng)則必須無菌）。
Peps6 磁珠存儲20緩沖液含 < 0.02% 疊化鈉，痕量疊化鈉不影響捕獲或微生物活力，使用前無需清洗磁珠。疊化鈉可能與銅或鉛管道反應(yīng)生成爆炸性疊氮化物，通過管道處理時需用大量水沖洗，防止疊氮化物堆積。
試劑和樣本需按照良21好實驗室規(guī)范處理，未使用的試劑、樣本和廢棄物需按當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)處置。
請勿使用過期試劑。22
7. 23重要提示
本方案為最多 5 mL 樣本中細(xì)菌結(jié)合的通用指南，根據(jù)細(xì)菌菌株、樣本性質(zhì)和體積，可能需要進(jìn)一步優(yōu)化以實現(xiàn)最佳結(jié)合能力。
ApoH 捕獲機(jī)制不同于24常規(guī)抗原 - 抗體相互作用，如需確保實驗成功，請聯(lián)系我們的技術(shù)支持。
捕獲細(xì)菌前，Peps62526磁珠不得渦旋、冷凍、干燥、高溫（>60°C）或端 pH（>9 或 < 5）處理。若需保留微生物活力，捕獲后也需遵循同樣注意事項。若懷疑微生物負(fù)載較27高，可增加磁珠體積。磁珠可結(jié)合大量微生物：1 µL 磁珠可從純培養(yǎng)物中結(jié)合1×107個大腸桿菌。
8. 28樣本采集與處理
現(xiàn)有數(shù)據(jù)表明，Peps6 磁珠可捕獲各種固體（懸浮后）或液體樣本中的細(xì)菌。
固體樣本（如肉類、29組織）需在 1X 捕獲緩沖液中研磨，過濾后再加入磁珠，否則磁珠可能被樣本顆粒卡住，無法磁化。
優(yōu)先使用新鮮樣本，30避免混合樣本。混合血液、血清或血漿可能形成凝塊，捕獲并聚集磁珠，使其無法結(jié)合微生物。
若進(jìn)行細(xì)菌添加實驗31，需使用臨床菌株而非 “標(biāo)準(zhǔn)菌株"（如 ATCC 菌株），許多標(biāo)準(zhǔn)菌株對 ApoH 蛋白或 Peps6 分子的親和力會下降。
使用全血時，需選擇32EDTA 抗凝劑。
所有稀釋或處理后的33樣本需迅速與 Peps6 磁珠接觸。
樣本體積可按比例調(diào)34整，若懷疑微生物滴度較低，可擴(kuò)大樣本體積。超過 5 mL 的樣本，需聯(lián)系技術(shù)支持。
受損微生物可能失去對 A35poH 蛋白或 Peps6 分子的親和力，因此：優(yōu)先使用新鮮樣本材料。
檢查冷凍樣本中細(xì)菌36的活力，避免樣本反復(fù)凍融。
使用劣質(zhì)樣本會導(dǎo)致37靈敏度下降。
9. 38使用說明
樣本在捕獲緩沖液中的稀釋
將樣本稀釋于捕獲緩沖液中并渦旋，稀釋后緩沖液終濃度必須為 1X：小體積樣本（1-199 µL）：將 TTGB 10X 緩沖液用無菌蒸餾水稀釋至 1X，加入足夠的 1X TTGB 緩沖液，使樣本總體積達(dá)到 1 mL。
大體積樣本（039.2-5.0 mL）：將 TTGB 10X 緩沖液用無菌蒸餾水稀釋至 2X，按 1:1 體積比加入樣本中。
捕獲步驟 40
使用前，通過輕柔吹打或手動倒置底重懸 Peps6 磁珠（切勿渦旋）。
每個樣本加入 20 41µL Peps6 磁珠。
輕輕混勻（切勿渦旋42）。
在 35-37°C 下43適當(dāng)攪拌孵育 30 分鐘：試管需直立并劇烈攪拌，使磁珠保持懸浮狀態(tài)（如設(shè)置 Thermomixer 為 1000 rpm）。
將反應(yīng)管置于磁鐵上44，直至所有磁珠側(cè)向沉淀且上清液澄清。
棄去上清液，避免擾45動磁珠沉淀，細(xì)菌即濃縮于沉淀中。
洗滌（可選）46
純培養(yǎng)物、血漿或血清無需洗滌，全血等復(fù)雜樣本可能需要洗滌：向磁鐵上的磁珠沉淀中輕輕加入 1 mL PBS（不含Ca2+/Mg2+），勿重懸磁珠。
棄去上清液，避免擾47動沉淀。
如需可重復(fù)洗滌一次48。
10.49 細(xì)菌檢測
結(jié)合的細(xì)菌可直接在 Peps6 磁珠上通過標(biāo)準(zhǔn)方案檢測（必要時可調(diào)整）。注意：小體積樣本需在加入重懸液前短暫離心磁珠沉淀。
培養(yǎng)：將磁50珠重懸于合適培養(yǎng)基中，直接涂布于培養(yǎng)皿，在細(xì)菌適宜溫度下孵育。
PCR：將51磁珠重懸于裂解緩沖液中，劇烈渦旋 15 秒以破壞沉淀。裂解后，通過磁鐵或離心（10,000 g，1 分鐘）去除磁珠，轉(zhuǎn)移上清液至新管，按常規(guī)流程提取 DNA 并進(jìn)行 PCR。
顯微鏡觀察52：將磁珠重懸于 PBS 或特定培養(yǎng)基中，磁珠無自發(fā)熒光，可用于熒光檢測。
其他方法：53將磁珠重懸于適當(dāng)溶液中，如需其他特定應(yīng)用，請聯(lián)系技術(shù)支持。
11.54 故障排除
以下為常見問題指南，如需進(jìn)一步幫助或定制方案，請聯(lián)系技術(shù)支持。
磁珠和緩沖液處理55需在無菌環(huán)境中打開 Peps6 磁珠瓶，污染會降低穩(wěn)定性和效率。
必須將磁珠加入樣本56中，而非反向操作。
使用無菌蒸餾水稀釋57緩沖液，確保混合后 TTGB 緩沖液為 1X 濃度。
檢查 TTGB 緩沖液58是否污染。
根據(jù)微生物或樣本類59型，可優(yōu)化捕獲緩沖液的選擇和用量。
大體積樣本 60
5-100 mL 大體積樣本需額外購買磁珠和緩沖液。
樣本稀釋：直接加入612X 或 10X 濃縮的 TTGB 緩沖液，使終濃度為 1X。
每個樣本加入 20 62µL 磁珠，超過 10 mL 的樣本可能需要增加磁珠體積。
超過 20 mL 的樣63本可采用軌道攪拌（設(shè)置為 3 rpm）代替直立攪拌。
大體積樣本需預(yù)溫至64室溫或孵育溫度后再加入磁珠。
孵育
-65 嚴(yán)格遵循溫度和時間以確保最佳結(jié)果。選擇足夠大的試管以66保證充分?jǐn)嚢瑁ㄈ?span> 1 mL 反應(yīng)用 1.5 mL 試管）。
試管需直立并劇烈攪67拌（如 1000 rpm），使用玻璃或聚丙烯試管，避免聚苯乙烯。
磁化
-6869 若上清液中殘留磁珠或沉淀被吸頭擾動，需延長磁化時間（細(xì)胞培養(yǎng)樣本通常 2 分鐘，全血樣本可達(dá) 15 分鐘）。使用高能釹磁鐵（870-12 kg 吸引力）確保磁珠全磁化，磁力過低會導(dǎo)致磁珠和微生物損失，過強(qiáng)可能使磁珠嵌入塑料管。
吸棄上清液前需去除71氣泡。
磁化時間不得超過 3720 分鐘，以免破壞微生物完整性。
洗滌
-73 細(xì)胞上清液、血漿或血清無需洗滌（除非檢測系統(tǒng)高度敏感），全血等復(fù)雜樣本可能需要洗滌 2 次，洗滌時需在磁鐵上操作，切勿渦旋。PBS 可替換為其他74洗滌緩沖液，需聯(lián)系技術(shù)支持確認(rèn)兼容性。
檢測
-75 部分細(xì)菌捕獲后無法培養(yǎng)（處于活但不可培養(yǎng)狀態(tài)），需通過顯微鏡或 PCR 驗證捕獲效果。裂解步驟至關(guān)重要，76裂解緩沖液效率取決于化學(xué)組成，建議添加裂解對照，可劇烈渦旋磁珠以確保裂解充分。
如需光密度測量，需77用磁鐵去除磁珠，僅檢測上清液（磁珠呈深棕色，會嚴(yán)重干擾光學(xué)測量）。
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